免疫組化檢測(cè)服務(wù)指應(yīng)用免疫學(xué)抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色,確定組織或細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)的定量檢查。
免疫組化檢測(cè)的常用方法:
1.免疫熒光法
是最早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。
2.免疫酶標(biāo)法
免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術(shù)。先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前的技術(shù)。主要優(yōu)點(diǎn)是定位準(zhǔn)確,對(duì)比度好,染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,適用于光鏡、電鏡研究等。目前免疫酶標(biāo)法在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等。
3.免疫膠體金技術(shù)
是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對(duì)蛋白的生物學(xué)活性沒有明顯影響。用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,可對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,甚至定量。特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位。也適合進(jìn)行光鏡觀察。